La preuve des structures tissulaires, des anticorps et des agents pathogènes par marquage immunitaire est populaire, moderne et précise. L'immunofluorescence fait référence au marquage immunitaire avec des anticorps fluorescents préparés qui sont faits pour briller sous la lumière UV.
Au Détection par immunofluorescence directe le substrat est examiné directement avec des anticorps lumineux, sans anticorps primaires ni antigènes artificiels.
Qu'est-ce que la détection par immunofluorescence directe?
La détection par immunofluorescence directe est une méthode de diagnostic basée sur des connaissances en immunologie, immunocoloration et immunohistochimie. L'accent est mis ici sur la capacité des anticorps à se lier à des points spécifiques dans un tissu ou à des antigènes dans un sérum. Ces lieux sont des épitopes.
Dans le diagnostic biochimique, il existe des anticorps artificiels ou mimétiques (singulier: mimétique) qui permettent de marquer ces liaisons anticorps-antigène par fluorescence ou radioactivité. Les conjugués d'anticorps artificiels se lient d'une part aux épitopes et d'autre part ont un marqueur fluorescent dans le cas de l'immunofluorescence. C'est une alternative à l'utilisation de marqueurs radioactifs. La particularité de la détection directe par immunofluorescence par rapport à la détection indirecte est que l'anticorps qui se lie à l'épitope de l'antigène dans le matériel examiné représente également le conjugué d'anticorps avec le marqueur fluorescent. Des anticorps supplémentaires ne sont pas nécessaires pour la détection directe.
La fluorescéine, qui brille sous la lumière UV, et l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC) sont utilisés comme colorants pour fabriquer les conjugués d'anticorps artificiels en immunofluorescence. Jusqu'à présent, cela se lit un peu compliqué, mais la détection par immunofluorescence directe est une méthode de diagnostic de laboratoire médical standard pour une grande variété de questions médicales. Les anticorps avec le colorant fluorescent sont prêts pour la vente.
Fonction, effet et objectifs
La détection directe par immunofluorescence est disponible pour les examens tissulaires afin de colorer certaines structures tissulaires. Mais ils sont également disponibles pour les cellules individuelles. La cytométrie en flux joue ici un rôle majeur. Enfin, il y a les immunodosages en phase solide et liquide. Les examens par immunofluorescence des tissus sont particulièrement importants en oncologie, c'est-à-dire dans le traitement médical des maladies cancéreuses.
Les antigènes spécifiques de la tumeur dans les tissus tumoraux peuvent être détectés directement par immunofluorescence. Ces examens sur des échantillons de tissus de tumeurs sont souvent importants pour savoir d'où proviennent les métastases existantes dans le corps ou pour juger si une tumeur est bénigne ou maligne. L'examen de cellules individuelles avec détection directe par immunofluorescence est utilisé pour trouver des antigènes viraux, des antigènes bactériens et d'autres épitopes.
Par exemple, vous pouvez savoir si les cellules sont infectées par un virus et à quel stade du cycle d'infection les cellules se trouvent. Le nom FACS (= Fluorescence-Activated Cell Sorting) est une méthode de cytométrie en flux très efficace dans laquelle les cellules marquées par fluorescence sont distribuées dans différents tubes à essai en fonction du type de couleur. Cette procédure est importante en immunologie, hématologie et maladies infectieuses.
Les tests d'immunofluorescence permettent la détection directe des toxines environnementales, des organismes génétiquement modifiés et de certains additifs dans les aliments. Dans cette configuration expérimentale, il y a toujours une phase solide et une phase liquide. De nombreux agents pathogènes, y compris le virus VIH qui cause le SIDA, pourraient également être détectés directement. Cependant, lors de la détection de maladies infectieuses et auto-immunes, il s'agit souvent de détecter des anticorps plutôt que des antigènes. Ce sont les molécules de défense formées par le système immunitaire du corps. Selon la définition présentée ici, de telles preuves ne sont alors pas des preuves directes, puisque les anticorps fluorescents ne se couplent pas directement aux propres antigènes du corps, mais aux antigènes du dispositif de test.
Ces antigènes du montage expérimental sont à leur tour liés aux propres anticorps du corps. La détection directe par immunofluorescence des infections courantes, par exemple les virus VIH et la chlamydia, n'est utilisée que dans les tests spéciaux de détection et de confirmation. Il existe des tests pour de nombreuses autres maladies. Dans la plupart des situations, la détection indirecte des anticorps est plus appropriée pour les maladies infectieuses, car le système immunitaire du corps a une capacité ingénieuse à se souvenir des infections précédentes. Dans d'autres situations, la détection directe des antigènes et la détection indirecte des anticorps se complètent. Ces derniers montrent qu'une infection s'est déjà produite, tandis que les premiers fournissent des informations plus précises sur l'état actuel de l'activité du pathogène.
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➔ Des médicaments pour renforcer la défense et le système immunitaireRisques, effets secondaires et dangers
Avec la détection par immunofluorescence directe, comme avec toutes les preuves médicales, il existe deux risques: le risque d'un résultat faux positif et le risque d'un résultat faux négatif. Des résultats faux et positifs provoquent un inconfort psychologique et un grand stress pour le patient.
Par conséquent, des procédures de test supplémentaires sont ajoutées aux résultats positifs, surtout si le diagnostic conduit à des changements de vie drastiques. Le risque d'un résultat faux et négatif est que le patient n'apprenne pas à temps la menace pour sa propre santé et peut-être même pour la santé publique. Par conséquent, il est bon de faire beaucoup de recherches et de faire et d'offrir un grand nombre de détections directes d'immunofluorescence différentes prêtes à la vente. Associé à d'autres méthodes de détection directe et indirecte des maladies et pathologies, cela augmente la précision du diagnostic.
La détection directe est basée sur le conjugué d'anticorps, qui d'une part se lie aux épitopes des antigènes et d'autre part provoque également la fluorescence. Un tel produit n'est donc utilisé que dans un type de procédure d'essai et n'est pas utilisé pour d'autres types de procédure d'essai.Il s'agit d'une différence procédurale importante par rapport à la preuve indirecte, dans laquelle les anticorps fluorescents sont précédés d'anticorps primaires pour la liaison à l'épitope. Le conjugué d'anticorps convient donc pour différents tests. Cette différence procédurale est différente de la différence médicale entre la détection indirecte des anticorps et la détection directe des antigènes.
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